توضیحات
ABSTRACT
For the detection of DNA hybridization, a new electrochemical biosensor was developed on the basis of the interaction of Doxirubicine (DOX) with 22-mer oligonucleotides (from human Colorectal cancer) a simple biosensing design to yield an ultrasensitive electrochemical biosensor for cancer biomarker detection on Screen Printed Gold Electrodes (SPGE) without use of any modification on electrode surface perhaps direct detection with the help of electroactive label (DOX) and MicroRNA92a (miRNA) as an biomarker selected for being up-regulated in Colorectal cancer. The biosensor was assembled in two stages the immobilization of the probe that was modified on an SPGE and second stage of target hybridization of completely match strand electroactive label DOX has been used after hybridization process which is an intercalator with our miRNA strands as an redox indicator for amplifying the electrochemical signal of miRNA 92a. For conformation electrochemical techniques including Cyclic Voltammetery (CV) and Differential Pulse Voltammetery (DPV). were used and hybridization was observed successfully .The final biosensor provided a sensitive detection of miRNA 92a with good selectivity.
INTRODUCTION
Cancer is a public health concern worldwide one in three women and one in two men will develop cancer during life time in developed countries. Colorectal cancer (CRC) is the third most common malignancy in the world, accounting for more than 1 million cases and 500,000 deaths per year (1). Because of its slow development from premalignant lesions, perspectives to reduce the burden of disease by early detection and treatments are particularly promising for this malignancy(2). Although colonoscopy is the most reliable method for early detection of CRC and its precursors available to date, the invasive nature and the cost incurred have hampered its widespread application(3). The fecal occult blood test (FOBT), which is the most widely used noninvasive screening tool so far, is limited by its low sensitivity, especially with respect to detection of preneoplastic lesions (4), but widespread application is so far limited by labor-intensive handling and high costs(5). miRNA deficiencies or up-regulations have been correlated with a number of clinically important diseases such as cancers (6,7). Early detection is the only known approach that may improve these indicators. Thus there is a urgent need to develop non-invasive simple and low risk methods for screening an prediction of such cancer. The major function of miRNA biosensors is to measure the signals of hybridization process(8,9). The hybridization of the probe to the target sequence can be detected using appropriate hybridization indicators(10). Oracet blue (OB) is an anthraquinone derivative elecroactive label previously studied by Nasirizadeh and collagues (11,12,13). In other studies the electrochemical properties of OB modified electrodes and their application as sensors to detect hydroxylamine and simultaneous determination of dopamine, ascorbic acid and uric acid.
چکیده
برای تشخیص هیبریداسیون DNA، بر اساس اثر متقابل دوکسیرربیین (DOX) با oligonucleotide 22-mer (از سرطان کولورکتال انسان) یک سیستم بیوسنسور الکتروشیمیایی جدید ساخته شد که یک حسگر بی حس کننده الکتروشیمیایی فوق حساس برای تشخیص زیست شناسی سرطان روی الکترود طلای الکتریکی چاپی (SPGE) بدون استفاده از تغییر در سطح الکترود، شاید با استفاده از برچسب الکتریکی (DOX) و MicroRNA92a (miRNA) به عنوان بیومارکر انتخاب شده برای تنظیم در سرطان کولورکتال انتخاب شود. بوسنسور در دو مرحله مونتاژ شده بود و پروب که بر روی SPGE اصلاح شده بود و مرحله دوم هیبریداسیون هدف از برچسب الکترواواژی کامل رشته ای DOX پس از فرآیند هیبریداسیون استفاده شده است که یک intercalator با رشته های miRNA ما به عنوان شاخص بازآفرینی برای تقویت سیگنال الکتروشیمیایی miRNA 92a. برای تکنیک های الکتروشیمیایی سازگاری از جمله ولتاژ سیکل (CV) و ولتاژ دیفرانسیل پالس (DPV). مورد استفاده قرار گرفتند و هيبريداسيون با موفقيت مشاهده شد. بيوسنسور نهايي، تشخيص حساس miRNA 92a را با انتخابي خوب انجام داد.
مقدمه
سرطان یک نگرانی سلامت عمومی در سراسر جهان است که یکی از سه زن است و یکی از دو مرد سرطان را در طول زندگی در کشورهای پیشرفته توسعه می دهد. سرطان کولورکتال (CRC) سومین شایع ترین بدخیمی در جهان است که بیش از 1 میلیون مورد آن را شامل می شود و 500000 مرگ و میر در سال است (1). با توجه به پیشرفت آشکار آن از ضایعات پیش زخمی، دیدگاه هایی برای کاهش بار بیماری توسط تشخیص زودهنگام و درمان به ویژه برای این بدخیمی ها امیدوار کننده است (2). اگر چه کولونوسکوپی روش قابل ملاحظه ای برای تشخیص زودرس CRC و پیش سازهای آن در حال حاضر در دسترس است، اما ماهیت تهاجمی و هزینۀ مصرف شده، کاربرد وسیع آن را مختل کرده است (3). آزمایش خون مخفیانه مدفوع (FOBT) که ابزار غربالگری غيرتهاجمی به طور گسترده ای در حال حاضر است، با حساسیت کم آن، بویژه در مورد تشخیص ضایعات پریودزی (4) محدود می شود، اما کاربرد وسیع آن تا کنون محدود شده است. دستکاری شدید و هزینه های بالا (5). کمبود miRNA یا تنظیم مقررات با تعدادی از بیماری های مهم بالینی مانند سرطان (6،7) مرتبط است. تشخیص زود هنگام تنها روش شناخته شده است که می تواند این شاخص ها را بهبود بخشد. بنابراین یک ضرورت فوری برای توسعه روش های ساده و کم خطر غیر تهاجمی برای غربالگری پیش بینی چنین سرطان وجود دارد. عملکرد اصلی بیوسنسورهای miRNA اندازه گیری سیگنال های فرآیند هیبریداسیون (8،9) است. Hybridization پروب به دنباله هدف می تواند با استفاده از شاخص های ترکیبی مناسب (10) شناسایی شده است. Oracet blue (OB) یک برچسب الکتریکی مشتق شده از آنتراکینون است که قبلا توسط نصیریزاده و کلاغ ها مورد مطالعه قرار گرفته است (11،12،13). در مطالعات دیگر خواص الکتروشیمیایی الکترودهای اصلاح شده OB و کاربرد آنها به عنوان حسگر برای تشخیص هیدروکسیلامین و تعیین همزمان دوپامین، اسید اسکوربیک و اسید اوریک است.
Year: 2017
Publisher : National Congress of Chemistry and Nanoscience, from Research to National Development
By : Farima Dehghan, Navid Nasirizadeh , Seyed Morteza Seifati
File Information: English Language/ 5 Page / size: 287 KB
سال :1396
ناشر : کنگره ملی شیمی و نانوشیمی,از پژوهش تا توسعه ملی
کاری از : فریامه دهقان، نوید نصیریزاده، سید مرتضی سیافاتی
اطلاعات فایل : زبان انگلیسی / 5 صفحه / حجم : KB 287
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.