High efficiency protoplast isolation from in vitro[taliem.ir]
اطلاع رسانی-Notices

High efficiency protoplast isolation from in vitro cultures and hairy roots of Maesa lanceolata

ارسال شده در ژوئن 14, 2018 در 8:48 ب.ظ توسط / بدون دیدگاه

ABSTRACT

In vitro cultures of the medicinal plant Maesa lanceolata were established to enable the cultivation of plant material for the production of protoplasts. Callus cultures were initiated using leaves collected from shoot  cultures and the root tips from hairy root cultures obtained upon Agrobacterium rhizogenes transformation. For the isolation of protoplast, the different explant material of M. lanceolata was exposed to an enzyme  mixture consisting of 1.5% cellulase, 0.5% macerozyme R-10 and 0.5 M mannitol. About 6 x 10protoplasts g-1 fresh weight were obtained from leaf material and 5 x 105 protoplasts g-1 fresh weight from callus. To obtain high amounts of hairy root protoplasts, the cultures were pretreated with the auxin indole- 3-butyric acid (IBA) that stimulated the formation of novel root tips. Using the dissected root tips as starting material, 8 x 105 protoplasts g-1 fresh weight were obtained per preparation. The protoplast isolation  method will enable further studies on the transformation and fusion of protoplasts from M. lanceolata.

INTRODUCTION

  Saponins are glycosides of steroidal or triterpenoid polycyclic structures with distinctive foaming  characteristic .They are produced by a wide variety of plant species as a defence mechanism against fungal, insect or herbivore attack (Francis et al., 2002; Papadopoulou et al., 1999) .Although in general saponins have strong haemolytic activity, several types have been shown to possess medicinal properties, e.g. the  ginseng saponins from Panax ginseng (Sparg et al., 2004). Species of the genus Maesa (Maesaceae) produce sapo-nins that are potentially interesting for the pharmaceutical industry. M. lanceolata is used in traditional medicine as a cure for Leishmania, e.g. in Rwanda, but it is also used for fishing by several tribes in Congo (Bagalwa and Chifundera, 2007; Maes et al., 2004b ; Sindambiwe et al., 1996). Bioassay guided fractionation  of the methanol extract of dried leaves of M. lanceolata resulted in the isolation of a triterpenoid saponin  mixture (Sindambiwe et al., 1996). This mixture had moderate virucidal and high haemolytic activity and showed a severe toxic effect on snails (Sindambiwe et al., 1998). Moreover, maesa saponins showed anti- angiogenic activity, which could be useful in the treatment of certain types of tumours (Apers et al., 2002). Currently, M. lanceolata is not cultivated and its medicinal uses are based on wild collecting.

چکیده

کشت گیاهان دارویی Maesa lanceolata در شرایط آزمایشگاهی برای تولید مواد گیاهی برای تولید پروتوپلاست ها امکان پذیر است. کشت باکتری با استفاده از برگ های جمع آوری شده از کشت شکار و نکات ریشه ای از کشت ریشه مو حاصل از تبدیل Agrobacterium rhizogenes آغاز شد. برای جداسازی پروتوپلاست، مواد الیاف مختلف مانیل لانسولاتا به یک مخلوط آنزیمی متشکل از 1.5٪ سلولاز، 0.5٪ ماکروزییم R-10 و مننیتول 0.5 M قرار گرفتند. حدود 6 × 106 پروپوپلاست g-1 وزن تازه از مواد برگ و 5 × 105 پروپوپلاست g-1 وزن تازه از کالوس دریافت شد. برای به دست آوردن مقادیر بالایی از پروتوپلاست های ریشه مو، کشت با استفاده از اسید اکسین اندولا 3-بوتیریک (IBA) که تحریک تشکیل ریشه های جدید ریشه را انجام می داد، پیش آگهی شد. با استفاده از ریشه های جدا شده ریشه به عنوان ماده اولیه، هر هشت هشتصد و پنجاه درصد پروپوپلاست G-1 در هر آماده سازی به دست آمد. روش جداسازی protoplast، مطالعات بیشتری را در مورد تبدیل و تلفیق پروتئوپلاست از M. lanceolata انجام خواهد داد.

مقدمه

Saponins گلیکوئوزید های ساختاری چند منظوره استروئیدی یا تری تریپروپوئید با خاصیت فوم مشخص است. آنها توسط انواع مختلفی از گونه های گیاهی به عنوان مکانیسم دفاع در برابر حمله قارچی، حشرات و گیاهان تولید می شوند (فرانسیس و همکاران، 2002؛ Papadopoulou و همکاران، 1999) . اگرچه به طور کلی ساپونین ها دارای فعالیت شدید همولیتیک هستند، مشخص شده است که انواع متعددی برای داشتن خواص دارویی، به عنوان مثال ساپونین جینسنگ از جینسنگ Panax (Sparg و همکاران، 2004). گونه های جنس Maesa (Maesaceae) Sapo-nins تولید می کنند که به طور بالقوه برای صنعت داروسازی جالب هستند. M. lanceolata در طب سنتی به عنوان درمان برای لیشمانیا استفاده می شود، به عنوان مثال در رواندا، اما همچنین برای ماهیگیری توسط چندین قبیله در کنگو (Bagalwa و Chifundera، 2007؛ Maes و همکاران، 2004b؛ Sindambiwe و همکاران، 1996) استفاده می شود. تجزیه بیوسیستری به وسیله ی تجزیه ی عصاره متانول برگ های خشک شده از M. lanceolata منجر به جداسازی مخلوط تریپروپوئید ساپونین شد (Sindambiwe et al.، 1996). این مخلوط دارای فعالیت بدنی متوسط ​​و شدید همولیتیک بود و اثرات شدید سمی روی حلزون نشان داد (Sindambiwe et al.، 1998). علاوه بر این، ساپونین های Maesa نشان دهنده فعالیت آنتی ژنیک است که می تواند در درمان انواع خاصی از تومور مفید باشد (Apers et al.، 2002). در حال حاضر، M. lanceolata کشت نشده است و مصرف داروهای آن بر اساس جمع آوری وحشی است.

Year: 2010

Publisher : IEEE

By : E. Lambert and D. Geelen

File Information: English Language/ 8 Page / size: 691 KB

Download

سال : 1389

ناشر : IEEE

کاری از : E. Lambert و D. Geelen

اطلاعات فایل : زبان انگلیسی / 8 صفحه / حجم : KB 691

لینک دانلود

پاسخ دهید